在臨床檢驗過程中有許多情況下標本采集后得不到及時檢測,如儀器故障、試劑短缺、停水停電、以及遠程檢驗需要標本的郵寄等等。往往要求標本4～8℃保存。究竟在不同溫度條件下,血清標本放置多長時間檢測不會超出實驗室允許范圍呢?有關臨床化學檢驗的參考書中所提及內容不盡一致。為此我們設計試驗對常用11項生化指標(ALT,AST,GGT,AKP,CK,HBDH,LDH,BUN,Cr,UA,Glu)在4種溫度條件下,6個時間點進行了研究,旨在探討不同溫度與時間下保存對檢測結果的影響。
1 材料與方法
1.1方法
標本采自某院健康體檢者、患者,按常規要求采血后分離血清并進行適當混血制成10mL1例的標本。每例標本分成25份,每份0.38mL,放入具蓋的Eppendorf管。1份用來即刻測定,其余24份分別放置-20℃、4℃、+20℃、+35℃4種溫度下,于4、8、12、24、48和72小時后重新測定。共測50例(放置小時的標本例數不等,其即刻測定標本與其它標本也非同源。每次測定標本時均同時測定質控要求質控結果始終控制在0.5SD之內,否則結果舍棄重測。
1.2儀器與試劑
儀器為OLYMPUSAU600生化分析儀,試劑Leadman公司試劑,RANDOX公司質控品,中科都菱-25℃的醫用冰箱,中科都菱4℃醫用冰箱。
1.3統計學分析
每個時間點的數據以平均值x形式表示。分別列出測定均值及變異百分數與即刻數據相減后,再除以即刻數據得出變異的百分數±%(+表示升高,-表示降低),然后與實驗室允許誤差范圍進行比較2結果不同溫度下的不同時間測定結果分別見表1～4。
3討論
從表1～4結果可以看出,總體趨勢是隨著保存溫度的升高及保存時間的延長,各項目的變化值也越大。一般大變化者在35℃放置72小時后出現。除CK在35℃放置72小時其變化超出了實驗室允許范圍外,其余均在實驗室允許范圍之內;變化不明顯的項目為AST、GGT、BUN。變化較明顯的有ALT、UA、CK。變化大者為CK.放置后檢測結果升高的有AKP、UA。下降的有ALT、LDH、HBDH、GLU、Cr、CK。CK在-20℃至20℃條件下保存72小時結果變化不大,而在35℃放置時測定值下降很快,說明CK在高溫條件下酶活性很不穩定,與文獻報告一致[1]。標本處理是檢驗前質量控制的一個重要環節,在全程質控中非常重要。我國臨床實驗室參考美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)的有關規定,要求臨床化學實驗室一般應于2小時內分離血清后測定。但有時會遇到諸如儀器故障,試劑短缺,停水停電,遠程檢驗標本的郵寄,錯檢漏檢時的重新檢驗,醫療糾紛中的檢驗結果的準確性舉證等等情況,這就要求把標本保存起來。一般認為,標本冷藏可抑制細胞代謝,穩定有些成分,但全血標本一般不宜冷藏。由于臨床化學檢驗血液標本一般用血清,因此建議標本保存應以離心后分離血清保存。我國有關部門要求血清在22～25℃保存不能超過8小時,8小時內不能完成試驗的應置4～8℃保存,48小時內不能完成試驗的應置-20℃保存[2]。這就要求實驗室要低溫保存大量的標本。對照本次試驗結果可以看出,10個項目在不同溫度下保存72小時結果未超出實驗室允許范圍,是可以接受的。這就為我們更方便的保存標本提供了實驗依據。有關血液標本的保存對生化檢驗結果的影響國內外已有許多報道[3,4],提示標本的保存要在密封避光的條件下低溫保存,以防水分蒸發光線照射造成有些項目的檢測結果發生變化.本研究對低溫高溫一起研究,除得到血清標本在低溫條件下保存的穩定性結果之外,更找出在達不到低溫保存條件時,一些生化項目在高溫時的穩定性.對于標本郵寄等情況下如何保存標本尤具指導義。本次研究的保存時間長72小時,有些項目在較低溫度條件下仍較穩定,至于更長時間放置,其穩定性如何尚需進一步探討。
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