一 保存：胃腺癌SGC7901細(xì)胞保存在專業(yè)的醫(yī)用冰箱中
二 目的：研究2-氨基4-(S-丁基磺酰亞氨)丁酸(BSO)對人胃腺癌SGC7901細(xì)胞化療敏感性的影響
三 方法：采用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)測定BSO對人胃腺癌SGC7901細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50),進而利用無毒濃度的BSO和乙酰半胱氨酸(NAC)預(yù)處理細(xì)胞后,檢測細(xì)胞對依托泊苷(VP-16)和多柔比星(ADM)化療敏感性的變化,同時,采用試劑盒檢測腫瘤細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽(GSH)含量,γ-谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)試劑盒測定γ-GCS活性,并以2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCHF-DA)測定不同處理條件下細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的改變。
四 結(jié)果 MTT實驗顯示,BSO對SGC7901細(xì)胞的IC50為3.5 mg/ml。根據(jù)藥物無毒濃度選擇原則,選取20%IC50BSO濃度(0.7 mg/ml)進行后續(xù)實驗。結(jié)果顯示,BSO通過抑制人胃腺癌SGC7901細(xì)胞內(nèi)γ-GCS酶活性來減少GSH合成(P<0.05),促使細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高(P<0.01),加入NAC后可部分逆轉(zhuǎn)BSO對GSH合成的抑制作用(P<0.05)。BSO與ADM和VP-16聯(lián)合作用后,使得二者的IC50值分別下降55.9%和71%。
五 結(jié)論 BSO通過抑制γ-GCS的活性,降低細(xì)胞內(nèi)GSH的含量,提高ROS水平,增強細(xì)胞化療敏感性。
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